Представитель рода Сульпициев, древнего патрицианского рода, представители которого долгое время не занимали высших должностей . Его отцом был всадник Квинт Сульпиций Руф. Получил качественное разностороннее образование в лучших традициях своего времени. Известно, что Сульпиций учился ораторскому делу вместе с Цицероном на Родосе в 78 до н. э.. В 74 до н. э. был назначен квестором Остии. В 65 до н. э. Руф занимал должность претора по делам о казнокрадстве. После окончания срока должности он отказался выехать в провинцию. Баллотировался в консулы на 62 до н. э., но проиграл выборы. После этого обвинил своего удачливого соперника Луция Лициния Мурену в незаконном соискании должности, но не смог добиться его осуждения.
В 53/52 до н. э., после беспорядков в Риме и получения известий о гибели в парфянской кампании триумвира Марка Лициния Красса общественное мнение склонялось к тому, чтобы сделать Гнея Помпея диктатором. Однако сенаторами был избран другой путь. Сульпиций был назначен интеррексом и провёл избрание Помпея консулом в одиночку, в обход сложившейся практики выборов.
В 51 до н. э. стал консулом; прямо не примыкал ни к цезарианцам, ни к помпеянцам. Воспрепятствовал проведению дополнительного набора солдат для киликийских и сирийских легионов. В гражданской войне 49-45 до н. э. занял нейтральную позицию, покинул Италию и некоторое время находился в Греции, пока в 46 до н. э. не примирился с Цезарем.
В марте 44 до н. э., после убийства Цезаря, внес предложение о запрете устанавливать доски с текстами его распоряжений . Умер в 43 до н. э., находясь в составе посольства от сената к Марку Антонию. По предложению Цицерона, он был похоронен за государственный счёт. Кроме того, за счёт государства была установлена его статуя.
Сульпиций был крупным юристом своего времени. Цицерон устами Брута сравнил себя с Сульпицием, добавив, что сам он «хотел знать гражданское право ровно настолько, насколько это было необходимо оратору», а Сульпиций «взял из красноречия только то, что помогало ему отстаивать гражданское право». Также он очень лестно отзывается о Сульпиции, отмечая, что его образованность помогала ему в рассмотрении различных вопросов права.
